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Strep-tag标签技术

Strep-tag是一种在蛋白纯化系统中常应用的亲和标签,有Strep-tag II和Twin Strep-tag两种类型。Strep-tag II是一个短肽标签,由8个氨基酸(序列Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys)组成,可以作为N端或C端标签与目标蛋白质融合表达,分子量大约1000Da,对重组蛋白的结构和功能研究影响很小。Twin Strep-tag是两个Strep-tag II序列顺序排列而来,该标签具有更强的亲和能力,能够像Strep-tag II一样进行温和、快速的纯化。这两个标签可以自由结合优化序列的Streptavidin配体。标签/配体的结合取决于所需的结合强度和应用。这两个标签和配体在μg/ml级别范围内有较高亲和性。此外,这种结合标签和配体的灵活性允许在生理条件下纯化重组蛋白。Strep-tag标记技术可用于从各种表达系统中纯化功能性链球菌标记蛋白,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌。该技术可耐受不同的缓冲条件和添加剂(高盐、洗涤剂、还原剂、金属离子和螯合剂),普遍适用于大部分蛋白质性质,而且方便于蛋白质和蛋白质质检相互作用分析。一般来说,上述两种标签都不干扰目标蛋白的折叠或生物活性,不与重金属离子反应,不具有离子交换特性,也不会引起蛋白质聚集。因此,纯化后无需去除Strep-tag II 和Twin Strep-tag。

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